Skip to content

Zmodyfikowany wektor -Retrovirus dla ciężkiego połączonego niedoboru odpornościowego związanego z X. AD 2

1 miesiąc ago

424 words

Terapia oceniana w tych badaniach prowadziła do rekonstytucji limfocytów T i do przeżycia wolnego od choroby, podobnego do związanego z allogenicznym HSCT.12-16 dopasowanego rodzeństwa. Jednak mutageneza insercyjna prowadząca do ostrej białaczki limfoblastycznej w komórkach T wystąpiła w 5 z 20 pacjentów z transaktywacją proto-onkogenów LMO2 lub CCND2 w pięciu białaczkach.17-19 W celu poprawy bezpieczeństwa przy zachowaniu skuteczności immunologicznej opracowaliśmy wektor retro-inaktywujący . (SIN) .-retrowirusowy (pSRS11.EFS.IL2RG.pre *, w skrócie SIN-.c), w którym usunięto enhancer LTR U3 wirusa mysiej białaczki Moloney. Zmodyfikowany wektor eksprymował komplementarny DNA IL2RG z krótkiego promotora eukariotycznego ludzkiego czynnika wydłużania 1., który kieruje powszechną ekspresją w komórkach ssaczych, i wcześniej wykazano, że jest mniej mutagenny in vitro. 20,21 Tutaj prezentujemy tymczasowe wyniki z badania pacjenci z SCID-X1 leczonym SIN-.c z usuniętym wzmacniaczem.
Metody
Produkcja wektorowa
Mapę genetyczną wektora przedstawiono na rysunku S1 w Dodatku uzupełniającym, dostępnym wraz z pełnym tekstem tego artykułu pod adresem. Projekt i badania in vitro ekspresji i skuteczności immunologicznej wektora SIN-.c i wytwarzanie wektora zostały opisane w innym miejscu.20-22
Pacjenci i protokół kliniczny
Do badania zakwalifikowano dziewięciu chłopców z potwierdzonymi mutacjami IL2RG, którzy mieli profile immunologiczne charakterystyczne dla SCID-X1 w równoległych badaniach fazy 1/2 przeprowadzonych w Paryżu (ClinicalTrials.gov number, NCT01410019, pięciu pacjentów), Londynie (NCT01175239, bez pacjentów) oraz w Stanach Zjednoczonych. Stany (NCT01129544, dwóch pacjentów w Bostonie, jeden pacjent w Cincinnati i jeden pacjent w Los Angeles). We wszystkich placówkach oferowano rekrutację dla niemowląt i dzieci, którym brakowało identycznego lub nie spokrewnionego z HLA dawcy lub którym podawano aktywną infekcję oporną na leczenie. W Paryżu, ze względu na różne wymagania francuskich agencji regulacyjnych, obecność zakażenia odpornego na terapię była warunkiem wejścia na studia. Pisemną świadomą zgodę uzyskano od opiekunów lub rodziców wszystkich pacjentów zgodnie z zatwierdzonymi przez lokalną instytucję kontrolną protokołami.
Komórki CD34 + oczyszczono ze szpiku kostnego przy użyciu systemu CliniMACS. Komórki następnie poddano transdukcji supernatantem SIN-.c o czystości klinicznej, 22 przy użyciu opublikowanych reżimów 13, 14, które były prawie identyczne z tymi stosowanymi w poprzednich próbach terapii genowej SCID-X1. We wszystkich placówkach zastosowano standardowe standardowe procedury operacyjne. Wspierającą opiekę kliniczną dostarczono zgodnie z lokalnymi normami instytucjonalnymi.
Analiza miejsca wstawienia i klonowania
Do analizy miejsc integracji DNA oczyszczono z próbek komórek krwi i analizowano za pomocą metod opisanych w innym miejscu 23-26 (patrz Dodatek dodatkowy)
[przypisy: usuwanie blizn potrądzikowych, plastyka krocza, terapia cranio-sacralna ]

Powiązane tematy z artykułem: plastyka krocza terapia cranio-sacralna usuwanie blizn potrądzikowych